[科普中国]-反式白藜芦醇苷

简介

反式白藜芦醇苷分子式为C20H22O8,化学名为反式- 3,4,5-三羟基芪- 3-β- D葡萄糖苷,是从多年生草本植物蓼科蓼属虎杖的根茎中分离提取的中药单体,研究证明具有抗菌、抗癌、抗炎、抗过敏、降血脂和抗氧化等多方面的药理活性,在心血管疾病和癌症的防治上具有良好的应用前景。

药代动力学材料与方法

药品与试剂

反式白藜芦醇苷标准品(纯度为99.5%,),乙腈(色谱纯),水为双蒸水,其他试剂均为分析纯。

仪器与动物

美国Agilent1100高效液相色谱仪,DAD紫外检测器,AnkeTGL- 16G- A离心机,QL- 901旋涡混合器。SD大鼠,雌雄各半,体重(200± 20)g。

色谱条件

色谱柱: Hypersil BDS C18硅烷键合硅胶填充柱(200 mm× 4.0 mm,5μm);流动相:乙腈- 1%冰醋酸溶液(22:78);流速:0.8 ml/min;检测波长:306 nm;柱温:25℃。1.4 血浆样品处理 取血浆200μl置于1.5 ml Ep-pendof管中,加入200μl乙腈沉淀蛋白,涡旋混合30 s,加入400μl水,涡旋混合1 min,于12 000 r/min高速离心10 min,0.2μm微孔滤膜滤过,吸取上清液20μl进样,峰面积外标法定量分析。

动物实验

取SD大鼠120只,雌雄各半,随机分为3组,分别按50,100,200 mg/kg的剂量灌胃给药,按1.0 ml/100 g体重计算,不同剂量组用不同浓度等容量灌胃给药,给药前禁食12 h,全程不禁饮水。于给药前及给药后5,10,15,20,25,30,40,50,60,90,120,150 min,从大鼠眼眶后静脉丛取血1 ml,静脉血样置于含肝素钠的离心管中,2 400 r/min离心10 min分离血浆。

统计学方法

将血药浓度(C)与时间(t)数据用DAS 1.0程序拟合,动力矩法计算药物动力学参数。

从药代动力学参数可以看出,大鼠灌胃反式白藜芦醇苷后,吸收迅速(tmax= 10.0～ 15.0 min),数据代入房室模型拟合,效果并不理想,因此采用动力矩法进行参数拟合。

本实验血浆样品处理采用乙腈直接沉淀蛋白,过滤膜后进样。方法简便、快速,但内标难以得到,虽然经实验发现芪类化合物二苯乙烯苷为内标时保留时间合适,但其稳定性差,故未采用内标法。实验发现,反式白藜芦醇苷在生物样品中不稳定,在- 20℃条件下保存24 h,生物降解30%～ 50%,应此采取大鼠血样后,应立即进行分析测定。

白藜芦醇苷属于二苯乙烯类衍生物,有顺式和反式两种异构体,反式白藜芦醇苷是在常温常压下可获得的稳定单体,在实验条件下,为避免光致异构化反应,无论是测定标准曲线,还是检测血浆样品,都应尽可能避光操作,否则在本实验条件下,约10.5 min处,出现正式白藜芦醇苷峰,由于没有标准品对照,无法测得其浓度,造成实验误差。

有文献指出,在肠道糖苷酶作用下,白藜芦醇苷可转化为白藜芦醇。在本试验条件下,白藜芦醇约在14.5 min出峰,检测限0.0625μg/ml,但在大鼠实测血浆样品中,没有检测到白藜芦醇峰,这说明白藜芦醇苷在大鼠,主要还是以原形形式吸收进入体循环的。1